標準類別 NY/T 農業行業推薦標準
標準名稱 畜禽細胞與胚胎冷凍保種技術規范 Procedures for cell and embryo cryopreservation of domestic animals
標準分類 養殖業->綜合標準
標準號 NY/T 1900—2010
頒布部門 中華人民共和國農業部
頒布日期 2010-07-08
實施日期 2010-09-01
關鍵字 畜禽細胞、胚胎冷凍、保種技術、技術規范
標準內容
1 范圍
本標準規定了用于保種的家畜精液、家畜卵母細胞、家畜胚胎和畜禽成纖維細胞冷凍保存技術要求。
本標準適用于家畜精液、家畜卵母細胞、家畜胚胎和畜禽成纖維細胞等遺傳物質冷凍保存和檢驗入庫。
2 規范性引用文件
下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。
GB 4143 牛冷凍精液
GB 20557 山羊冷凍精液
NY/T 1234 牛冷凍精液生產技術規程
NY/T 1 674 牛羊胚胎質量檢測技術規程
3 術語及定義
下列術語和定義適用于本文件。
3.1 超低溫保存 cryopreservation
在液氮中冷凍保存遺傳物質的技術多彩彩票时时彩。
3.2 卵母細胞 oocyte
來源于有腔卵泡具有繁殖能力的細胞。
3.3 成纖維細胞 fibroblast
以畜禽組織或胎兒為材料，體外培養多彩彩票时时彩、分離出的梭形或不規則形細胞多彩彩票时时彩。胞質近中央處有橢圓形胞核，胞體一般鋪展很開多彩彩票时时彩，細胞之間排列疏松，有較大細胞間隙。
3.4 供體 donor
提供精液、卵母細胞、成纖維細胞或胚胎的個體。
4 細胞冷凍保存
4.1 家畜精液冷凍保存
4.1.1 數量
每個品種保存精液不少于3000劑(豬0.5mL細管不少于30000劑)多彩彩票时时彩，每個品種公畜不少于10頭，每個個體保存凍精不少于300劑多彩彩票时时彩多彩彩票时时彩。
4.1.2 供體
符合其品種特性、特征多彩彩票时时彩；三代以內無親緣關系，系譜清楚；健康、無傳染性疾病、遺傳疾捕嗖什势笔笔辈??；有檢疫證明。
4.1.3 劑型
牛、羊、鹿、犬0.25mL細管多彩彩票时时彩；馬多彩彩票时时彩、驢0.5mL細管；豬0.5mL細管或5mL細管多彩彩票时时彩。
4.1.4 標記
標明生產單位、品種、供體號和生產日期多彩彩票时时彩。
4.1.5 精液冷凍
牛冷凍精液制作應按NY/T 1234的規定執行；山羊和綿羊冷凍精液制作按GB 20557的規定執行多彩彩票时时彩；其他家畜精液冷凍程序參照NY/T 1234和GB 20557的規定執行；不同家畜精液冷凍稀釋液配方見附錄B多彩彩票时时彩。
4.1.6 質量檢測
牛冷凍精液質量檢測按GB 4143的規定執行；山羊冷凍精液質量檢測按GB 20557的規定執行多彩彩票时时彩多彩彩票时时彩；其他家畜冷凍精液的質量檢測按GB 4143的規定執行，具體指標要求見附錄C。
4.2 卵母細胞冷凍保存
4.2.1 數量
每個品種保存卵母細胞不少于1000個，牛和綿羊每個品種母畜不少于50頭多彩彩票时时彩，每個個體保存卵母細胞不少于20個多彩彩票时时彩；其他家畜每個品種母畜不少于35頭多彩彩票时时彩，每個個體保存卵母細胞不少于30個。
4.2.2 供體
供體要求同4.1.2多彩彩票时时彩多彩彩票时时彩。
4.2.3 劑型
0.25mL細管，每支含卵母細胞不多于10個；OPS玻璃化冷凍每劑不多于5個。
4.2.4 標記
標記要求同4.1.4多彩彩票时时彩多彩彩票时时彩。
4.2.5 卵母細胞的采集與冷凍
卵母細胞的采集與冷凍參照附錄D多彩彩票时时彩。
4.2.6 質量檢測
卵母細胞冷凍一解凍后達到A級或B級。
4.3 成纖維細胞冷凍保存
4.3.1 數量
公畜禽不少于10頭(只)，母畜禽不少于25頭(只)，每個個體體外培養第3～4代細胞6管，細胞密度為1×105個/mL～5×105個/mL多彩彩票时时彩。
4.3.2 供體
供體要求同4.1.2。
4.3.3 劑型
2mL凍存管。
4.3.4 標記
標明生產單位多彩彩票时时彩、品種多彩彩票时时彩、細胞來源、供體號、性別、培養代數多彩彩票时时彩多彩彩票时时彩、凍存編號和凍存日期。
4.3.5 成纖維細胞的體外培養和冷凍保存
成纖維細胞的體外培養和冷凍保存方法參照附錄E。
4.3.6 質量檢測
臺盼藍染色檢查細胞存活力80%以上，生長曲線與冷凍前體外生長曲線相近多彩彩票时时彩，核型正常，無病原菌和支原體。具體方法參照附錄E。
5 胚胎冷凍保存
5.1 數量
每個品種冷凍保存體內胚胎不少于200枚，每個品種公畜不少于10頭多彩彩票时时彩，母畜不少于25頭，每個種公畜配種獲得的胚胎數不少于20枚，凍前胚胎質量為A級多彩彩票时时彩。
5.2 供體
供體要求同4.1.2多彩彩票时时彩。
5.3 劑型
0.25mL細管，每支細管1枚～2枚多彩彩票时时彩。
5.4 標記
標明生產單位多彩彩票时时彩、品種、公畜號、母畜號、胚胎發育期、冷凍方法、等級、數量和生產時間多彩彩票时时彩。
5.5 胚胎采集和冷凍保存
胚胎采集和冷凍保存方法參照附錄F。
5.6 質量檢測
牛多彩彩票时时彩、羊冷凍胚胎按NY/T 1674的規定執行，其他畜種參照NY/T 1674的規定執行多彩彩票时时彩。
6 品種資料及冷凍保存技術資料
